嘔吐毒素ELISA試劑盒檢測原理及注意事項？
 

　　原理
 

　　測定的基礎(chǔ)是抗原-抗體反應。微孔板上包被有抗抗體。加入嘔吐毒素(DON)標準品或樣品、酶標抗原和抗體后，游離的嘔吐毒素與酶標抗原競爭結(jié)合抗體，抗體或抗體結(jié)合物與固定在微孔板上的抗抗體再結(jié)合，沒有結(jié)合的標準品、酶標抗原及抗體被洗去，加入TMB底物顯藍色，加入終止液后顏色由藍變黃，用酶標儀在450nm處檢測，吸光值與樣品中嘔吐毒素含量成負相關(guān)，與標準曲線比較即可得出嘔吐毒素的含量。
 

　　注意事項
 

　　1)室溫低于20℃或試劑及樣品未回到室溫(20- 25℃)會導致數(shù)值偏低。
 

　　2)在洗板過程中如果出現(xiàn)板孔干燥過久的情況，則會出現(xiàn)標準曲線不成線性，重復性不好的現(xiàn)象。所以洗板排干后應立即進行下一步操作。
 

　　3)標準物質(zhì)和顯色液對光敏感，避免直接暴露在光線下。
 

　　4)混合要均勻，洗板要干凈(包括加樣品和標準液的時候都必需充分混合均勻)。
 

　　5)終止液為強酸性物質(zhì)，避免接觸皮膚。
 

　　6)不要使用過了有效期的試劑盒，也不要混合使用不同批次的試劑盒，這樣會引起測定結(jié)果不準確。
 

　　7)試劑盒的儲存條件是2-8℃，切勿冷凍。